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北京鑒聯基因科技有限公司
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HLA分型

  細胞鑒定     |      2022-08-24 17:15:43
HLA分型SSO法
簡介
LABType® SSO使用序列特異性的寡核苷酸探針連接到熒光染色的微珠上來檢測樣品DNA編碼的等位基因。LABType® SSO技術只需PCR擴增靶DNA,雜交和檢測在同一個反應混合物中完成,所以該方法既適于小規模又適于大規模的的HLA分型實驗。相對于淋巴細胞毒試驗的實驗結果(1=陰性--- 8=陽性),LABType®的試驗結果只有陰性和陽性兩種結果,這就排除了復雜的結果分析。此外,HLA系統的交叉反應組導致血清學分型錯綜復雜,而PCR-SSO(聚合酶鏈式反應—序列特異性寡核苷酸)能區分單個核苷酸的改變。

SSO原理
LABType®在反向SSO DNA分型法中應用Luminex技術。首先,靶DNA使用組特異性引物進行PCR擴增。PCR產物是被生物素化的,可以使用R-藻紅蛋白結合鏈霉親和素(SAPE)進行檢測。
PCR產物先被變性,然后再與包被在微珠上的DNA-探針互補雜交。流式分析儀LABScan ™100(Luminex100/200)或LABScan ™3D(Luminex®FLEXMAP 3D)檢測每個微珠的熒光強度。根據反應類型與已發表HLA基因序列相關反映類型的比較來判定HLA分型結果。

產品優勢
1、  擁有CE、FDA、CFDA認證;
2、  完善的客服和專業的技術支持;
3、  國內各大臨床醫院及血液中心穩定使用;
4、  精確,快速,高通量,經濟;
5、  自動讀取數據和分析結果,降低人為誤差;
6、  無需電泳,避免接觸有毒物質;
7、  比SSP方法DNA用量少,濃度要求低。

Luminex方法原理
流式熒光技術,又稱懸浮陣列、液態芯片。經過近20多年的發展,已經成為全球科研、醫藥和臨床機構廣泛采用的的一種高通量、高速度的生物學檢測方法。流式熒光有機整合了抗原抗體免疫反應、核酸多重擴增、基于微球的多指標聯檢、毛細管液流分析、多色激發熒光和高速數字信號處理技術,具有很高的門檻。

流式熒光聯檢特色的核心是把一定大?。?.5~7μm)、不同熒光染料染色的烯聚物小球(統稱編碼微球),共價交聯上針對特定檢測物的探針、抗原或抗體。應用時,直接混合不同檢測物的編碼微球,再加入微量待檢樣本,在懸液中靶分子與微球表面交聯的分子進行特異性地結合,在一個反應孔內即可以同時完成數十上幾百種不同的生物學反應,而不相互干擾。最后用流式細胞檢測類儀器進行分析,儀器通過多束激光及其被照物(生物化學標記物)的發射吸收譜、信號強度,來識別編碼微球、以及定量樣品中各單項指標數值(通過對各檢測微球上報告分子的熒光強度讀數)。

流式熒光技術相關的研究論文頻頻刊登在《自然》、《臨床化學》、《臨床與診斷免疫學》、《臨床微生物》、《基因組研究》、《蛋白質組研究》、《癌癥》等國際權威學術雜志上。隨著更多開發及應用者的重視、硬件技術的發展和聯檢分析物的快速增加,其主流地位得到進一步鞏固。

實驗流程
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